క్రిమిరహిత గది ప్రామాణీకరణ విధానాలు మరియు అంగీకార నిర్దేశాలు

1. ఉద్దేశ్యం: ఈ విధానం అసెప్టిక్ ఆపరేషన్లు మరియు స్టెరైల్ గదుల రక్షణ కోసం ఒక ప్రామాణిక విధానాన్ని అందించడమే లక్ష్యంగా పెట్టుకుంది.

2. వినియోగ పరిధి: జీవ పరీక్షల ప్రయోగశాల

3. బాధ్యతగల వ్యక్తి: క్యూసీ సూపర్‌వైజర్ టెస్టర్

4. నిర్వచనం: ఏదీ లేదు

5. భద్రతా జాగ్రత్తలు

సూక్ష్మజీవుల కాలుష్యాన్ని నివారించడానికి క్రిమిరహిత కార్యకలాపాలను ఖచ్చితంగా నిర్వహించండి; ఆపరేటర్లు స్టెరైల్ గదిలోకి ప్రవేశించే ముందు UV దీపాన్ని ఆపివేయాలి.

6. విధానాలు

6.1. స్టెరైల్ గదిలో ఒక స్టెరైల్ ఆపరేషన్ గది మరియు ఒక బఫర్ గది ఉండాలి. స్టెరైల్ ఆపరేషన్ గది యొక్క శుభ్రత క్లాస్ 10000 స్థాయికి చేరుకోవాలి. గది లోపలి ఉష్ణోగ్రతను 20-24°C వద్ద మరియు తేమను 45-60% వద్ద నిర్వహించాలి. క్లీన్ బెంచ్ యొక్క శుభ్రత క్లాస్ 100 స్థాయికి చేరుకోవాలి.

6.2. క్రిమిరహిత గదిని శుభ్రంగా ఉంచాలి మరియు కలుషితం కాకుండా నివారించడానికి చెత్తను పోగు చేయడం ఖచ్చితంగా నిషేధించబడింది.

6.3. అన్ని స్టెరిలైజేషన్ పరికరాలు మరియు కల్చర్ మీడియా కలుషితం కాకుండా ఖచ్చితంగా నివారించాలి. కలుషితమైన వాటిని ఉపయోగించడం ఆపివేయాలి.

6.4. క్రిమిరహిత గదిలో 5% క్రెసోల్ ద్రావణం, 70% ఆల్కహాల్, 0.1% క్లోర్‌మెథియోనిన్ ద్రావణం మొదలైన క్రియాశీల గాఢత గల క్రిమిసంహారకాలు అమర్చబడి ఉండాలి.

6.5. క్రిమిరహిత గది యొక్క పరిశుభ్రత అవసరాలకు అనుగుణంగా ఉండేలా చూసుకోవడానికి, ఆ గదిని తగిన క్రిమిసంహారక మందుతో క్రమం తప్పకుండా క్రిమిరహితం చేసి శుభ్రపరచాలి.

6.6. స్టెరైల్ గదిలోకి తీసుకురావాల్సిన అన్ని పరికరాలు, పాత్రలు మరియు ఇతర వస్తువులను గట్టిగా చుట్టి, తగిన పద్ధతుల ద్వారా క్రిమిరహితం చేయాలి.

6.7. స్టెరైల్ గదిలోకి ప్రవేశించే ముందు, సిబ్బంది సబ్బు లేదా క్రిమిసంహారక మందుతో చేతులు కడుక్కోవాలి, ఆ తర్వాత బఫర్ గదిలో ప్రత్యేక పని దుస్తులు, బూట్లు, టోపీలు, మాస్కులు మరియు గ్లౌజులు ధరించాలి (లేదా స్టెరైల్ గదిలోకి ప్రవేశించే ముందు 70% ఇథనాల్‌తో చేతులను మళ్ళీ తుడుచుకోవాలి). బాక్టీరియల్ ఛాంబర్‌లో ఆపరేషన్లు నిర్వహించాలి.

6.8. స్టెరైల్ గదిని ఉపయోగించే ముందు, స్టెరైల్ గదిలోని అతినీలలోహిత దీపాన్ని 30 నిమిషాలకు పైగా వికిరణం మరియు స్టెరిలైజేషన్ కోసం తప్పనిసరిగా ఆన్ చేయాలి, మరియు అదే సమయంలో గాలిని ఊదడం కోసం క్లీన్ బెంచ్‌ను కూడా ఆన్ చేయాలి. ఆపరేషన్ పూర్తయిన తర్వాత, స్టెరైల్ గదిని సకాలంలో శుభ్రం చేసి, ఆపై 20 నిమిషాల పాటు అతినీలలోహిత కాంతితో స్టెరిలైజ్ చేయాలి.

6.9. తనిఖీకి ముందు, కలుషితం కాకుండా నిరోధించడానికి పరీక్ష నమూనా యొక్క బయటి ప్యాకేజింగ్‌ను చెక్కుచెదరకుండా ఉంచాలి మరియు తెరవకూడదు. తనిఖీకి ముందు, బయటి ఉపరితలాన్ని క్రిమిరహితం చేయడానికి 70% ఆల్కహాల్ దూది ఉండలను ఉపయోగించండి.

6.10. ప్రతి ఆపరేషన్ సమయంలో, క్రిమిరహిత ఆపరేషన్ యొక్క విశ్వసనీయతను తనిఖీ చేయడానికి నెగటివ్ కంట్రోల్ చేయాలి.

6.11. బ్యాక్టీరియా ద్రవాన్ని పీల్చుకునేటప్పుడు, దానిని పీల్చుకోవడానికి మీరు తప్పనిసరిగా సక్షన్ బాల్‌ను ఉపయోగించాలి. స్ట్రాను నేరుగా మీ నోటితో తాకవద్దు.

6.12. ఇనాక్యులేషన్ సూదిని ప్రతి ఉపయోగం ముందు మరియు తర్వాత మంటతో స్టెరిలైజ్ చేయాలి. చల్లారిన తర్వాత, కల్చర్‌ను ఇనాక్యులేట్ చేయవచ్చు.

6.13. బ్యాక్టీరియా ద్రవం ఉన్న స్ట్రాలు, టెస్ట్ ట్యూబ్‌లు, పెట్రీ డిష్‌లు మరియు ఇతర పాత్రలను క్రిమిరహితం చేయడానికి 5% లైసోల్ ద్రావణం ఉన్న స్టెరిలైజేషన్ బకెట్‌లో నానబెట్టాలి, మరియు 24 గంటల తర్వాత బయటకు తీసి శుభ్రంగా కడగాలి.

6.14. బల్లపైన లేదా నేలపైన బ్యాక్టీరియా ద్రవం పడినట్లయితే, దానిని శుభ్రపరిచే ముందు, కలుషితమైన ప్రదేశంపై వెంటనే 5% కార్బోలిక్ ఆమ్ల ద్రావణాన్ని లేదా 3% లైసోల్‌ను కనీసం 30 నిమిషాల పాటు పోయాలి. పని దుస్తులు మరియు టోపీలు బ్యాక్టీరియా ద్రవంతో కలుషితమైనప్పుడు, వాటిని వెంటనే తీసివేసి, అధిక పీడన ఆవిరి స్టెరిలైజేషన్ తర్వాత ఉతకాలి.

6.15. సజీవ బ్యాక్టీరియా ఉన్న అన్ని వస్తువులను కుళాయి కింద కడిగే ముందు క్రిమిరహితం చేయాలి. మురుగునీటి కాలువను కలుషితం చేయడం ఖచ్చితంగా నిషిద్ధం.

6.16. క్రిమిరహిత గదిలోని కాలనీల సంఖ్యను నెలవారీగా తనిఖీ చేయాలి. క్లీన్ బెంచ్ తెరిచి, 90 మి.మీ. లోపలి వ్యాసం గల కొన్ని క్రిమిరహిత పెట్రీ డిష్‌లను తీసుకుని, కరిగించి సుమారు 45°C వరకు చల్లార్చిన సుమారు 15 మి.లీ. న్యూట్రియెంట్ అగర్ కల్చర్ మీడియంను క్రిమిరహితంగా అందులోకి ఎక్కించాలి. అది గట్టిపడిన తర్వాత, దానిని 30 నుండి 35°C ఇంక్యుబేటర్‌లో తలక్రిందులుగా ఉంచి 48 గంటల పాటు ఇంక్యుబేట్ చేయాలి. క్రిమిరహితత్వాన్ని నిర్ధారించుకున్న తర్వాత, 3 నుండి 5 ప్లేట్లను తీసుకుని, వాటిని పని చేసే ప్రదేశానికి ఎడమ, మధ్య మరియు కుడి వైపున ఉంచాలి. మూత తెరిచి 30 నిమిషాల పాటు గాలికి వదిలిన తర్వాత, వాటిని 30 నుండి 35°C ఇంక్యుబేటర్‌లో 48 గంటల పాటు తలక్రిందులుగా ఉంచి, బయటకు తీసి పరీక్షించాలి. క్లాస్ 100 క్లీన్ ఏరియాలోని ప్లేట్‌పై ఉండే వివిధ రకాల బ్యాక్టీరియా సగటు సంఖ్య 1 కాలనీకి మించకూడదు, మరియు క్లాస్ 10000 క్లీన్ రూమ్‌లో సగటు సంఖ్య 3 కాలనీలకు మించకూడదు. పరిమితిని మించిపోతే, పునరావృత తనిఖీలు అవసరాలకు అనుగుణంగా ఉండే వరకు క్రిమిరహిత గదిని పూర్తిగా క్రిమిరహితం చేయాలి.

7. "ఔషధ పరిశుభ్రత తనిఖీ పద్ధతులు" మరియు "ఔషధ తనిఖీ కోసం చైనా ప్రామాణిక నిర్వహణ పద్ధతులు" లోని (వంధ్యత్వ తనిఖీ పద్ధతి) అధ్యాయాన్ని చూడండి.

8. పంపిణీ విభాగం: నాణ్యత నిర్వహణ విభాగం

క్లీన్ రూమ్ సాంకేతిక మార్గదర్శనం:

ఒక నిర్దిష్టమైన, తెలిసిన సూక్ష్మజీవిని అధ్యయనం చేయడానికి లేదా వాటి విధులను ఉపయోగించుకోవడానికి, క్రిమిరహిత వాతావరణం మరియు క్రిమిరహిత పదార్థాలను పొందిన తర్వాత, మనం ఆ క్రిమిరహిత స్థితిని కొనసాగించాలి. లేకపోతే, బయటి నుండి వివిధ సూక్ష్మజీవులు సులభంగా కలిసిపోతాయి. బయటి నుండి సంబంధం లేని సూక్ష్మజీవులు కలిసిపోయే ఈ దృగ్విషయాన్ని మైక్రోబయాలజీలో కలుషిత బ్యాక్టీరియా అంటారు. కాలుష్యాన్ని నివారించడం అనేది మైక్రోబయాలజీ పనిలో ఒక కీలకమైన పద్ధతి. ఒకవైపు సంపూర్ణ క్రిమిరహితీకరణ, మరోవైపు కాలుష్య నివారణ అనేవి అసెప్టిక్ టెక్నిక్‌లోని రెండు అంశాలు. అంతేకాకుండా, మనం అధ్యయనం చేస్తున్న సూక్ష్మజీవులు, ముఖ్యంగా వ్యాధికారక సూక్ష్మజీవులు లేదా ప్రకృతిలో ఉనికిలో లేని జన్యుపరంగా మార్పు చెందిన సూక్ష్మజీవులు, మన ప్రయోగాత్మక పాత్రల నుండి బయటి వాతావరణంలోకి తప్పించుకోకుండా నిరోధించాలి. ఈ ప్రయోజనాల కోసం, మైక్రోబయాలజీలో అనేక చర్యలు ఉన్నాయి.

స్టెరైల్ గది అనేది సాధారణంగా మైక్రోబయాలజీ ప్రయోగశాలలో ప్రత్యేకంగా ఏర్పాటు చేయబడిన ఒక చిన్న గది. దీనిని షీట్లు మరియు గాజుతో నిర్మించవచ్చు. దీని వైశాల్యం మరీ పెద్దగా ఉండకూడదు, సుమారు 4-5 చదరపు మీటర్లు మరియు ఎత్తు సుమారు 2.5 మీటర్లు ఉండాలి. స్టెరైల్ గదికి బయట ఒక బఫర్ గదిని ఏర్పాటు చేయాలి. గాలి ప్రవాహం ద్వారా ఇతర బ్యాక్టీరియా లోపలికి రాకుండా నిరోధించడానికి, బఫర్ గది తలుపు మరియు స్టెరైల్ గది తలుపు ఒకే దిశలో ఉండకూడదు. స్టెరైల్ గది మరియు బఫర్ గది రెండూ తప్పనిసరిగా గాలి చొరబడకుండా ఉండాలి. లోపలి వెంటిలేషన్ పరికరాలలో గాలి వడపోత పరికరాలు తప్పనిసరిగా ఉండాలి. స్టెరైల్ గది యొక్క నేల మరియు గోడలు నునుపుగా, మురికి చేరడం కష్టంగా మరియు శుభ్రపరచడం సులభంగా ఉండాలి. పని చేసే ఉపరితలం సమతలంగా ఉండాలి. స్టెరైల్ గది మరియు బఫర్ గది రెండింటిలోనూ అతినీలలోహిత దీపాలు అమర్చబడి ఉంటాయి. స్టెరైల్ గదిలోని అతినీలలోహిత దీపాలు పని చేసే ఉపరితలం నుండి 1 మీటర్ దూరంలో ఉంటాయి. స్టెరైల్ గదిలోకి ప్రవేశించే సిబ్బంది క్రిమిరహితం చేసిన దుస్తులు మరియు టోపీలు ధరించాలి.

ప్రస్తుతం, స్టెరైల్ గదులు ఎక్కువగా మైక్రోబయాలజీ ఫ్యాక్టరీలలో ఉంటాయి, అయితే సాధారణ ప్రయోగశాలలు క్లీన్ బెంచ్‌ను ఉపయోగిస్తాయి. క్లీన్ బెంచ్ యొక్క ప్రధాన విధి ఏమిటంటే, లామినార్ ఎయిర్ ఫ్లో పరికరాన్ని ఉపయోగించి పని చేసే ఉపరితలంపై ఉన్న సూక్ష్మజీవులతో సహా వివిధ రకాల చిన్న ధూళి కణాలను తొలగించడం. ఈ విద్యుత్ పరికరం గాలిని హెపా ఫిల్టర్ గుండా పంపించి, ఆపై పని చేసే ఉపరితలంపైకి ప్రవేశించేలా చేస్తుంది, తద్వారా పని చేసే ఉపరితలం ఎల్లప్పుడూ ప్రవహించే శుభ్రమైన గాలి నియంత్రణలో ఉంటుంది. అంతేకాకుండా, బయటి నుండి బ్యాక్టీరియాతో కూడిన గాలి లోపలికి రాకుండా నిరోధించడానికి, బయటి వైపుకు దగ్గరగా ఒక హై-స్పీడ్ ఎయిర్ కర్టెన్ ఉంటుంది.

కఠినమైన పరిస్థితులు ఉన్న ప్రదేశాలలో, క్లీన్ బెంచ్‌కు బదులుగా చెక్క స్టెరైల్ బాక్సులను కూడా ఉపయోగించవచ్చు. ఈ స్టెరైల్ బాక్స్ సరళమైన నిర్మాణాన్ని కలిగి ఉంటుంది మరియు తరలించడానికి సులభంగా ఉంటుంది. బాక్స్ ముందు భాగంలో రెండు రంధ్రాలు ఉంటాయి, ఉపయోగంలో లేనప్పుడు వీటిని పుష్-పుల్ డోర్లతో మూసివేయవచ్చు. ఉపయోగంలో ఉన్నప్పుడు మీరు మీ చేతులను లోపలికి చొప్పించవచ్చు. లోపలి పనిని సులభతరం చేయడానికి ముందు భాగంలోని పై భాగంలో గాజు అమర్చబడి ఉంటుంది. బాక్స్ లోపల ఒక అతినీలలోహిత దీపం ఉంటుంది, మరియు పక్కన ఉన్న చిన్న తలుపు ద్వారా పాత్రలు మరియు బ్యాక్టీరియాను లోపల పెట్టవచ్చు.

ప్రస్తుతం అసెప్టిక్ ఆపరేటింగ్ టెక్నిక్‌లు మైక్రోబయాలజికల్ పరిశోధన మరియు అనువర్తనాలలో కీలక పాత్ర పోషించడమే కాకుండా, ట్రాన్స్‌జెనిక్ టెక్నాలజీ, మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ టెక్నాలజీ మొదలైన అనేక బయోటెక్నాలజీలలో కూడా విస్తృతంగా ఉపయోగించబడుతున్నాయి.